Tạp chất Semaglutide

Tạp chất Semaglutide|Kiểm soát tạp chất Simeglutide|Tổng hợp tùy chỉnh tạp chất và xác nhận cấu trúc|Khoa học-Peptit

Kiểm soát tạp chất Soma Lutide (Simeglutide) - cho GLP-1 nghiên cứu chất lượng thuốc, gửi thuốc gốc. Khoa học-Peptide cung cấp sự tổng hợp tùy chỉnh các tạp chất liên quan đến Soma Lutide, bao gồm các peptide bị thiếu, tạp chất bị oxy hóa, sản phẩm tẩy da chết bằng axit béo, tạp chất liên quan đến chuỗi PEG, v.v., kèm theo dữ liệu xác nhận cấu trúc. Chúng tôi có thể hỗ trợ nghiên cứu hồ sơ tạp chất của bạn. Chào mừng bạn đến liên hệ với chúng tôi.

Semaglutide (còn được gọi là Semaglutide) đã bùng nổ trong những năm này. Novo Nordisk dựa vào đó để đẩy giá trị thị trường lên vị trí thứ hai thế giới, các nhà sản xuất thuốc generic peptide trong nước gần như không nhìn chằm chằm vào nó. Dạng bào chế uống và dạng tiêm đều là những thị trường lớn. Sau khi bằng sáng chế hết hạn, ai là người đầu tiên có thể thực hiện nghiên cứu chất lượng, ai sẽ có cơ hội sở hữu loại thuốc gốc đầu tiên.

 

Tuy nhiên, thành thật mà nói, việc nghiên cứu chất lượng của somatostatin khó hơn so với nhiều peptide. Nó là một peptit 31-có chuỗi axit béo (axit octadecanedioic) và một trình liên kết PEG. Cấu trúc này xác định phổ tạp chất của nó là các peptide thiếu - đặc biệt phong phú, tạp chất bị oxy hóa, sản phẩm thải axit béo, tạp chất liên quan đến chuỗi PEG, các chất làm mờ, mỗi chất phải có sự kiểm soát, mỗi chất phải rõ ràng. Đặc biệt là chuỗi PEG, không có trong các peptide thông thường, chỉ có ở Somalutide.

 

Chúng tôi đã tích lũy được nhiều kinh nghiệm trong việc tổng hợp các tạp chất peptide phức tạp. Chúng tôi chuyên nghiên cứu về somatostatin và chúng tôi biết những khó khăn trong hồ sơ tạp chất của nó và những mục kiểm soát thiết yếu là gì. Chúng tôi có thể tùy chỉnh việc tổng hợp các biện pháp kiểm soát Tạp chất Semaglutide khác nhau theo nhu cầu của bạn, với dữ liệu xác nhận cấu trúc và giúp bạn thiết lập phương pháp, để bạn ít có khả năng bị cấp phần bổ sung khi nộp đơn.

Cấu trúc phân tử của somatostatin xác định rằng cấu hình tạp chất của nó phức tạp hơn nhiều so với các peptide thông thường. Khi chúng tôi thực hiện nghiên cứu về tạp chất, chúng tôi chủ yếu tập trung vào các loại sau:

Thiếu peptit
31 axit amin, bất kỳ axit nào bị thiếu trong quá trình tổng hợp, đều là tạp chất. Thời gian lưu của các peptide bị thiếu trên HPLC được phân bổ rộng rãi, với độ phân cực khác nhau của các peptide bị thiếu ở các vị trí khác nhau. Một số bị thiếu ở đầu N-, một số ở giữa và một số ở gần vị trí gắn axit béo. Chúng tôi đã nhận được đơn đặt hàng từ một khách hàng yêu cầu khoảng chục peptide bị thiếu ở các vị trí khác nhau để xác định tất cả các tạp chất có thể bị thiếu trong quy trình của họ.

Tạp chất oxy hóa
Somalutide có methionine (Met) trong chuỗi của nó, dễ bị oxy hóa thành sulfoxide và sau đó thành sulfone. Các tạp chất bị oxy hóa thường xuất hiện trong các nghiên cứu về độ ổn định và phát triển sau một thời gian. Chúng tôi đã thực hiện một so sánh, trong điều kiện tăng tốc trong một tháng, đỉnh oxy hóa có thể tăng lên hơn 0,3% mà không thể kiểm soát được.

Sản phẩm thải axit béo
Chuỗi bên axit béo (axit octadecanedioic) của somatostatin được gắn vào lysine thông qua một liên kết, và sự biến đổi này có thể bị loại bỏ một phần trong quá trình tổng hợp hoặc bảo quản. Vấn đề hơn là sự bong tróc có thể xảy ra ở các vị trí khác nhau - giữa axit béo và chất liên kết, cũng như giữa chất liên kết và peptit - dẫn đến các tạp chất khác nhau. Chúng tôi đã tổng hợp một số tạp chất liên quan đến axit béo-cho khách hàng của mình, từ loại bỏ hoàn toàn đến chỉ một phần nhỏ.

tạp chất liên quan đến chuỗi PEG-
Đây là loại tạp chất cụ thể nhất trong somatostatin. Nó có một liên kết PEG (polyethylene glycol) và chuỗi PEG có thể bị đứt, rút ​​ngắn hoặc trùng hợp trong quá trình tổng hợp, dẫn đến một loạt tạp chất liên quan. Những tạp chất này không được tìm thấy trong các peptide thông thường, nhưng chỉ có ở somatostatin và rất khó nghiên cứu trong các nghiên cứu chất lượng. Chúng tôi đã tạo ra nhiều biến thể khác nhau của việc xóa chuỗi PEG, rút ​​ngắn chuỗi PEG và oxy hóa chuỗi PEG.

Dimer/polyme
Hai hoặc nhiều phân tử somatostatin tập hợp lại với nhau tạo thành dạng dimer hoặc cao hơn. Trọng lượng phân tử của dimer gấp đôi so với đỉnh chính và nó thường là đỉnh rộng trên HPLC, do đó nó phải được tách biệt và tinh chế đặc biệt trước khi có thể sử dụng làm đối chứng. Chúng tôi đã chuẩn bị các dimer và phải mất nhiều vòng tinh chế để đạt được độ tinh khiết trên 95%.

Tạp chất đã khử amit
Asparagine (Asn) và glutamine (Gln) dễ dàng bị khử amit trong điều kiện axit hoặc nhiệt, tạo thành các chất đồng phân. Có một số Asn và Gln trong chuỗi somatostatin và tạp chất khử amit thường xuất hiện trong thử nghiệm phân hủy cưỡng bức, do đó sản phẩm đối chứng phải được sử dụng để xác định tạp chất.

Đồng phân không đối quang
Trong quá trình tổng hợp chuỗi dài, các axit amin riêng lẻ có thể trải qua quá trình phân biệt chủng tộc, tạo ra các đồng phân không đối quang. Hàm lượng loại tạp chất này thường không cao nhưng khi khai báo, chuyên gia sẽ hỏi, tốt nhất nên có sản phẩm đối chứng để xác nhận.

Nhiều tạp chất trong số này không thể mua được và cần phải được tổng hợp tùy chỉnh. Chúng tôi đã thực hiện rất nhiều dự án về việc tùy chỉnh tạp chất somatostatin, bao gồm tất cả các loại trên.

Việc loại bỏ chuỗi peptide
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, có xác nhận MS và NMR. Chúng tôi đã tổng hợp được một bộ peptide có khoảng cách 5 axit amin từ đầu N-đến đầu cuối C-.

Tạp chất oxy hóa
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95% và chúng tôi có thể cung cấp phổ LC{1}}MS để xác nhận mức độ oxy hóa. Sulfoxide và sulfone được phân tách bằng HPLC và chúng ta có thể thực hiện cả hai.

Sản phẩm thải axit béo
Đây là trọng tâm chính của tạp chất Somalutide. Chuỗi axit béo có thể bị bong ra hoàn toàn hoặc một phần. Chúng ta có thể tổng hợp một loạt các biến thể cho các vị trí rụng lông khác nhau. Trong một trong những dự án phức tạp nhất mà chúng tôi từng thực hiện, khách hàng yêu cầu chúng tôi tổng hợp một tạp chất có 6 nguyên tử cacbon bị thiếu trong chuỗi axit béo và chúng tôi phải mất hai tháng để làm đúng.

tạp chất liên quan đến chuỗi PEG-
Đây là một trong những tạp chất khó loại bỏ nhất của somatostatin và cũng là thế mạnh của chúng tôi. Chuỗi PEG có thể bị thiếu, bị rút ngắn, bị đứt, bị oxy hóa và có thể tạo ra nhiều biến thể khác nhau. Chúng tôi đã tạo ra tạp chất với chuỗi PEG bị thiếu hoàn toàn (tức là de{4}}PEGylat somatostatin), biến thể có chiều dài chuỗi PEG giảm đi một nửa và sản phẩm có chuỗi PEG bị oxy hóa. Khách hàng được cấp các biện pháp kiểm soát này và phổ của tạp chất liên quan đến PEG{6}}đã được thiết lập đầy đủ.

Dimer
Các chất điều chỉnh độ sáng được hình thành bằng cách-liên kết chéo hoặc tương tác không{1}}cộng hóa trị có thể được điều chế bằng các phương pháp khác nhau và được tách và tinh chế để cung cấp các biện pháp kiểm soát có độ tinh khiết cao. Việc tinh chế các dimer tốn nhiều công sức nhưng chúng tôi có kinh nghiệm để biết cách tách các monome.

Tạp chất đã khử amit
Đối với các vị trí Asn và Gln trong trình tự, chúng ta có thể chuẩn bị các biện pháp kiểm soát tạp chất đã khử amit bằng cách phân hủy cưỡng bức hoặc tổng hợp có mục tiêu. Sự khác biệt về trọng lượng phân tử sau khi khử amit chỉ là 1, MS không dễ phân biệt nên chúng tôi thường sử dụng NMR hoặc các điều kiện sắc ký đặc biệt để xác nhận.

Tạp chất tùy chỉnh Dther
Nếu bạn tìm thấy một tạp chất mới chưa biết trong nghiên cứu của mình, chúng tôi có thể giúp bạn phân tích cấu trúc và tổng hợp nó. Gửi mẫu cho chúng tôi, chúng tôi sẽ thực hiện phân tích LC{1}}MS, suy đoán cấu trúc, sau đó tổng hợp định hướng, sau đó so sánh thời gian lưu và phổ khối để xác nhận sự đồng thuận. Chúng tôi đã thực hiện quá trình này nhiều lần và tỷ lệ thành công khá cao.

Phát triển và xác nhận phương pháp phân tích
Khi thiết lập phương pháp HPLC hoặc LC{0}}MS, cần phải kiểm soát tạp chất để định vị, xác định độ tách, xác minh phạm vi tuyến tính và khả năng phục hồi. Nếu không có điều khiển, quá trình xác thực phương thức sẽ bị thiếu một phần. Nhiều khách hàng yêu cầu chúng tôi làm một số tạp chất chính trước để thiết lập phương pháp, sau đó từ từ bù đắp phần còn lại.

Phép đo khối phổ không đồng nhất
Khi một loại thuốc gốc được công bố, cần phải phân tích định tính và định lượng toàn diện các tạp chất trong quá trình và các sản phẩm thoái hóa. Vị trí, hàm lượng và cấu trúc của từng tạp chất cần được xác nhận bằng sản phẩm kiểm soát. Chúng tôi đã thấy những thông tin khai báo được gửi đi để bù đắp, chín trong số mười lần là những tạp chất của phần này không hiểu được.

Nghiên cứu độ ổn định
Trong các thử nghiệm tăng tốc và độ ổn định lâu dài, cần phải xác định sản phẩm xuống cấp nào chiếm ưu thế và xu hướng nội dung là gì. Với việc kiểm soát tạp chất, có thể định lượng và giám sát chính xác. Một khách hàng đang nghiên cứu độ ổn định của chế phẩm somatostatin và nhận thấy rằng đỉnh thoái hóa tăng nhanh trong điều kiện tăng tốc, vì vậy chúng tôi đã phân tích bằng MS và tổng hợp để xác nhận cấu trúc, sau đó khách hàng cảm thấy nhẹ nhõm khi báo cáo.

Thử nghiệm phát hành hàng loạt
Sau khi thương mại hóa, mỗi lô API hoặc công thức cần phải được kiểm tra chất được đề cập. Kiểm soát tạp chất là công cụ cần thiết để thử nghiệm phát hành.

Thông tin về khai báo thuốc generic
Nghiên cứu tạp chất là một phần quan trọng của thông tin nộp hồ sơ. Việc cung cấp dữ liệu kiểm soát và lập hồ sơ tạp chất hoàn chỉnh giúp giảm đáng kể nguy cơ đưa ra đánh giá.

Trường hợp 1: Một công ty dược phẩm, chương trình thuốc generic Somalutide
Họ đang phát triển một phiên bản chung của somatostatin và cần một bộ kiểm soát tạp chất hoàn chỉnh để xác nhận phương pháp. Chúng tôi đã tùy chỉnh 15 tạp chất cho chúng: 6 peptide bị thiếu, 2 tạp chất bị oxy hóa, 1 dimer, 2 sản phẩm tẩy da chết bằng axit béo, 3 tạp chất liên quan đến chuỗi PEG và 1 tạp chất khử amit. Độ tinh khiết của mỗi loại đều trên 95%, với dữ liệu MS và NMR. Người quản lý dự án cho biết: "Các tạp chất của Somalutide phức tạp hơn các peptide khác, đặc biệt là PEG mà chúng tôi đã tìm kiếm ở một số công ty, nhưng họ đều nói rằng họ không thể làm được. Nhưng bạn đã có thể làm được tất cả và dữ liệu đã hoàn chỉnh, đó là một sự trợ giúp tuyệt vời." Sau đó, việc xác nhận phương pháp của họ đã hoàn tất thành công và hiện họ đang chuẩn bị nộp đơn.

Trường hợp 2: A CRO, nghiên cứu đặc biệt về tạp chất trong chuỗi PEG
Họ đã thực hiện một dự án nghiên cứu chất lượng về somatostatin, đòi hỏi phải phân tích toàn diện các tạp chất liên quan đến chuỗi PEG. Chúng tôi đã tổng hợp một cách có hệ thống các tạp chất liên quan đến PEG-: hoàn toàn không có chuỗi PEG, giảm một nửa độ dài chuỗi PEG, quá trình oxy hóa các đầu chuỗi PEG và chia chuỗi PEG thành hai phần. tổng hợp tổng cộng 8 tạp chất liên quan đến PEG{4}}. Khách hàng đã sử dụng các biện pháp kiểm soát này để thiết lập một bộ phương pháp phát hiện tạp chất PEG hoàn chỉnh, phương pháp này đã trở thành điểm nổi bật trong thông tin nộp hồ sơ của họ.

Trường hợp 3: Nghiên cứu độ ổn định, một công ty công nghệ sinh học
Họ đang thực hiện một nghiên cứu về độ ổn định của công thức somatostatin và phát hiện ra rằng hàm lượng của sản phẩm thoái hóa tăng nhanh trong điều kiện tăng tốc, nhưng họ không biết nó là gì. Chúng tôi đã phân tích mẫu bằng LC-MS, giả định rằng đó là một axit béo thải tạp chất ở một vị trí nhất định, sau đó tổng hợp mẫu đó theo cách có mục tiêu và xác nhận bằng cách so sánh. Họ đã thiết lập một xét nghiệm sử dụng biện pháp kiểm soát này và theo dõi chính xác xu hướng của sản phẩm thoái hóa này. Sau này, khi nộp báo cáo, phần dữ liệu này đã được các chuyên gia nhấn mạnh và vì dữ liệu chắc chắn nên không có khoản bồi thường nào được đưa ra.

Somatostatin là một sản phẩm siêu phổ biến, nhưng nghiên cứu tạp chất là một công việc tế nhị, đặc biệt là các tạp chất liên quan đến chuỗi PEG và các sản phẩm tẩy da chết bằng axit béo mà nhiều nhà sản xuất không thể xử lý được. Nếu bạn đang thực hiện nghiên cứu chất lượng hoặc phát triển chung somatostatin và cần kiểm soát tạp chất, vui lòng nói chuyện với chúng tôi. Chúng tôi đã làm rất nhiều việc, chúng tôi biết khó khăn là gì và chúng tôi biết cách giải quyết.